Как оценить эффект средства от плесени для кожи?
Оценка противогрибкового действия противогрибкового средства для кожи обычно включает два аспекта. С одной стороны, определение эффективности противогрибкового агента, основная цель которого - определить, обладает ли лекарство способностью подавлять или уничтожать плесень.
Обычно используемые методы оценки включают: метод зоны ингибирования, метод заливки в чашку, метод точечных бактерий, метод разведения культуры, метод диффузии, определение минимальной ингибирующей концентрации (MIC) и т.д .; с другой стороны, противогрибковый эффект после добавления ингибитора плесени к коже. Обычно используемые методы лабораторной оценки включают: метод зоны ингибирования, метод естественного воздействия, метод суспендирования в влажных помещениях, метод закапывания в почву, метод среды и т.п.
В настоящее время кожевники часто используют следующие методы лабораторной оценки.
(1) метод зоны подавления
Используя круглую бумагу или круглую оболочку (обычно диаметром от 2 до 4 см), погруженные или вращаемые в определенной концентрации раствора против плесени в течение определенного периода времени, а затем прикрепленные к культуре покрытия определенным количеством суспензия спор плесени Центрировать планшет, затем инкубировать в течение определенного периода времени при температуре (28 ± 1) ° C, относительной влажности ≥ 95%, наблюдать наличие или отсутствие прозрачной зоны ингибирования вокруг круглой бумаги или круглой кожи или используйте штангенциркуль для измерения диаметра грибовидного круга. Метод зоны ингибирования - это только качественный или полуколичественный метод, и размер зоны ингибирования зависит от способности ингибитора плесени распространяться на чашке с агаром (с природой ингибитора плесени, растворителем ингибитор плесени, растворенный в ингибиторе плесени) Тип, состав среды, распределение противогрибкового агента в коже и условия культивирования - все это сильно влияет, и, таким образом, эталонный эффект ограничен. Однако этот метод также имеет преимущества, заключающиеся в простоте работы, распознаваемости невооруженным глазом, хорошей визуализации и т.п., и часто используется для предварительной оценки эффекта защиты от плесени ингибитора плесени.
(2) Метод минимальной ингибирующей концентрации (МИК)
Ингибитор тест-плесени приготавливают в серии концентраций, затем 1 мл отбирают в асептических условиях, добавляют в стерилизованную культуральную чашку, а затем 1 мл тестовой бактериальной суспензии вводят в каждую культуральную чашку (или с помощью петли для посева) суспензию тестируемого штамма наносят штрихами на чашку с агаровой средой, в которую фунгицид добавлен и затвердевает, и, наконец, в каждую из культуральных чашек вводят агаризованную среду с заданной температурой 40 ° C, равномерно перемешивают и коагулируют. Его помещают в среду с температурой (28 ± 1) ° C и относительной влажностью ≥ 95% на период времени (обычно от 3 до 5 дней), и можно проверить самую низкую концентрацию исследуемых видов и в сравнении. Метод МИК - это количественный метод, которые могут лучше отражать вирулентность противогрибкового агента и облегчать сравнение противогрибковых эффектов различных противогрибковых агентов. Это один из наиболее часто используемых методов выражения вирулентности. Однако существует множество факторов, влияющих на значение МИК, таких как источник тестового штамма, количество инокулята, количество спор плесени в суспензии спор плесени, среда, тип растворителя, в котором растворен ингибитор плесени, условия культивирования и т. д., поэтому МИК ингибитора плесени следует проводить в тех же условиях.
(3) Метод подвешивания в мокрой камере
Кожу, обработанную средством против плесени (обычно длинный квадрат 2,5 см × 5,0 см), распыляют на поверхность кожи спреем формы для суспендирования спор, а затем суспендируют в камере с постоянной температурой и влажностью. Температура была (28 ± 1) ° C, относительная влажность ≥ 95%], культивировали в течение 28 дней, и состояние плесени наблюдали регулярно, и о влиянии ингибитора плесени на плесень судили по длительному состоянию плесени на коже.
Тестируемыми штаммами обычно являются Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Penicillium citrinum, Penicillium fuliginea и Trichoderma. Этот метод измерения представляет собой ускоренный тест, моделирующий естественную среду. Сопротивление плесени образца 0 или 1 балл, а остальные неквалифицированные. У каждого из этих методов есть свои преимущества и недостатки. Для одного и того же средства против плесени могут использоваться разные методы оценки. Результаты могут быть разными. Даже если используется один и тот же метод, результаты будут разными из-за разных условий, таких как время, место и тестер. Различия. Следовательно, методы ускоренных испытаний этих лабораторий имеют только определенное эталонное значение, и реальные эксплуатационные характеристики противогрибкового агента также должны быть проверены на практике.
